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微生物實驗室培養基的使用說明指引(三)性能測試

放大字體  縮小字體 發布日期:2024-04-25  來源:上海撫生實業有限公司
核心提示:培養基是液體、半固體或固體形式的,含天然或合成成分,用于保證微生物繁殖或保持其活力的物質。培養基的制備和使用是微生物實驗

培養基是液體、半固體或固體形式的,含天然或合成成分,用于保證微生物繁殖或保持其活力的物質。培養基的制備和使用是微生物實驗室檢測工作的重要環節,培養基自身質量的優劣、保存是否得當、配制使用是否正確等都直接影響到檢測結果的準確性。

四、培養基的性能測試

1.外觀控制

制備好的培養基應有相應的顏色,一般的培養基應澄清、無渾濁、無沉淀。使用前應檢查培養基的顏色是否發生變化,是否蒸發/脫水。

2.污染控制

從每批制備好的培養基中選取部分進行污染測試(無菌試驗),確定無微生物生長方可使用。

3.性能測試

(1)測試菌株選擇 測試菌株是具有其代表種的穩定特性并能有效證明實驗室特定培養基最佳性能的一套菌株,應來自國際/國家標準菌種保藏中心ATCC標準菌株,菌株的選擇參考衛生行業標準WS/T232-2002《商業性微生物培養基質量檢驗規程》。

(2) 定量測試方法(改良Miles-Misra法) 測試菌株過夜培養物10倍遞增稀釋;測試平板和參照平板劃分為4個區域并標記;從最高稀釋度開始,分別滴一滴稀釋液于試驗平板和對照平板標記好的區域;將稀釋液涂滿整個1/4區域,37℃培養18小時;對易計數的區域計數,按公式計算生長率(生長率=待測培養基平板上得到的菌落總數/參考培養基平板上獲得的菌落總數)。非選擇性培養基上目標菌的生長率應不低于0.7,該類培養基應易于目標菌生長;選擇性培養基上目標菌的生長率應不低于0.1。

(3)半定量測試方法(改進的劃線法接種法) 平板分ABCD四區,共劃16條線,平行線大概相隔0.5cm,每條有菌落生長的劃線記作1分,每個僅一半的線有菌落生長記作0.5分,沒有菌落生長或生長量少于劃線的一半記作0分,分數加起來得到生長指數G。目標菌在培養基上應呈現典型的生長,而非目標菌的生長應部分或全被抑制,目標菌的生長指數G大于6時,培養基可接受。

(4)定性測試方法(平板接種觀察法) 用接種環取測試菌培養物,在測試培養基表面劃平行直線。按標準中規定的培養時間和溫度對接種后的平板進行培養,目標菌應呈現良好生長,并有典型的菌落外觀、大小和形態,非目標菌應是微弱生長或無生長。

總之,培養基的質量是微生物實驗室檢測工作的基礎,事關檢測工作的準確性、可靠性,在微生物實驗室檢測工作中舉足輕重。如果在工作中忽視任何一個環節的質量問題,都將導致檢驗結果科學性、客觀性的偏離。因此,加強培養基的實驗室質量控制,認真地做好培養基的質控工作,不斷完善和提高培養基的質控水平,才能為微生物檢測實驗室提供高質量的培養基。

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編輯:songjiajie2010

 
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